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冷凍組織研磨儀高效助力裸鼠腫瘤組織塊樣品蛋白的研磨提取實驗

更新時間:2024-04-02   更新時間:2024-04-02   點擊次數(shù):538次

  實驗目的:通過對裸鼠腫瘤組織樣品的前處理研磨破碎,提取樣品中的蛋白;再驗證通過外泌體干預的荷瘤鼠模型中,腫瘤的基因表達情況是否與蛋白測序結果一致。

  

  實驗設備:冷凍組織研磨儀 JXFSTPRP-CLN-48

  

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  裸鼠腫瘤組織樣品的前處理研磨實驗操作過程:

  

  1.將小鼠通過注射麻醉劑慢慢失去知覺后,對小鼠進行解剖取小鼠身上的腫瘤塊。

  

  2.取下腫瘤塊后在將腫瘤塊剪切成綠豆大小的塊狀,可先放入液氮或者-80℃的冰箱中方便后期研磨。

  

  3.冷凍研磨儀開機,先將儀器制冷功能打開,溫度設置成-20℃,保證樣品在研磨時蛋白不會發(fā)生裂解。

  

  4.研磨儀預設溫度達到后,將剛剛取好剪切后的樣品放入研磨管中,每個研磨管盡量放100mg左右,再往研磨管中加入4顆研磨珠,再加入蛋白提取液蓋上研磨管蓋,進行濕磨。將研磨管放入適配器中,適配器再固定到研磨儀上。

  

  5.設置研磨儀參數(shù),設置好研磨頻率和時間,研磨次數(shù)2次,研磨中斷時間15s,經過研磨后,再進行蛋白的提取。

  

  實驗前處理研磨操作注意事項:

  

  1、研磨管放到適配器上,一定要注意研磨管的平面配平,否則會損壞研磨儀的寶塔。

  

  2、適配器在放到研磨儀寶塔上時,固定螺母一定要固定緊,否則既會損壞研磨儀寶塔,還會對適配器底部造成損壞。

  

  裸鼠腫瘤組織樣品的前處理研磨實驗前后效果圖:

  

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  實驗結果:裸鼠腫瘤組織樣品在經過冷凍組織研磨儀儀的前處理研磨實驗應用后,其對裸鼠腫瘤組織樣品提取的蛋白含量充足;且低溫冷凍的實驗環(huán)境也為蛋白質活性的保留、核酸降解的抑制得到的有效解決。


  冷凍組織研磨儀能在非常短的時間內將土壤、植物和動物的組織,器官等樣品完成研磨、粉碎。隨著近代醫(yī)學的發(fā)展,特別是腫瘤學和免疫學的需要,動物組織的研磨已經成為了實驗室不可少的一個環(huán)節(jié)。JXFSTPRP-CLN-48低溫研磨樣品,實現(xiàn)無交叉污染的同時,低溫研磨樣品能夠有效抑制核酸降解、保留蛋白質活性。是實驗室樣品前處理的好幫手。

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